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1. dna探针用什么标记？

1、dna探针用什么标记？

通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。

近年来，已发展了一些用非同位素如生物素-亲合素系统、地高辛配体等作为标记物的方法。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。最常用的探针标记法是缺口平移法(nick translation)。

首先用适当浓度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探针DNA双链上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去带有5’磷酸的核苷酸；

同时又利用该酶的5’→3’聚酶活性，使32P标记的互补核苷酸补入缺口，DNA聚合酶Ⅰ的这两种活性的交替作用，使缺口不断向3’的方向移动，同时DNA链上的核苷酸不断为32P标记的核苷酸所取代。

探针的标记也可以采用随机引物法，即向变性的探针溶液加入6个核苷酸的随机DNA小片段，作为引物，当后者与单链DNA互补结合后，按碱基互补原则不断在其3’OH端添加同位素标记的单核苷酸，这样也可以获得比放射性很高的DNA探针。

DNA探针通常使用放射性同位素或荧光染料进行标记。
DNA探针是一种用于检测和定位DNA序列的分子工具。
为了使DNA探针能够被检测到，需要对其进行标记。
常见的标记方法包括使用放射性同位素或荧光染料。
放射性同位素标记的DNA探针通过将放射性同位素（如32P或35S）与DNA探针分子结合，从而使其具有放射性。
当探针与目标DNA序列结合时，放射性同位素会发出特定的放射性信号，可以通过放射计或放射自显影等方法进行检测和定位。
荧光染料标记的DNA探针则通过将荧光染料（如荧光素、荧光素同系物或染料标记的核苷酸）与DNA探针分子结合，从而使其具有荧光特性。
当探针与目标DNA序列结合时，荧光染料会发出特定的荧光信号，可以通过荧光显微镜或荧光检测仪器进行检测和定位。
DNA探针的标记方法不仅可以帮助科学家们准确检测和定位目标DNA序列，还可以在分子生物学、遗传学和医学等领域中广泛应用，例如基因检测、疾病诊断和研究等。

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